250mm液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
以下是一個(gè)250mm液相色譜柱選購(gòu)指南,幫助您做出正確的選擇:
1、樣品性質(zhì):首先需要考慮待分析的樣品性質(zhì),包括化學(xué)性質(zhì)、分子大小、溶解度等。不同的樣品可能需要不同類(lèi)型的液相色譜柱,如正相、反相或離子交換柱。
2、分析目標(biāo):明確您的分析目標(biāo)是什么。是進(jìn)行定性分析還是定量分析?您是否需要分離和測(cè)定特定的化合物或類(lèi)別?這些信息將有助于確定柱材和分離機(jī)制。
3、柱材選擇:常見(jiàn)的柱材包括硅膠、C18、C8、氨基等。硅膠柱適用于一般的非極性分析,而碳鏈長(zhǎng)短和功能化基團(tuán)選擇則取決于樣品和分析目標(biāo)。
4、粒徑和孔徑:粒徑是指固定相顆粒的大小,通常以微米為單位表示。較小的粒徑能夠提供更高的分離效果,但也會(huì)增加背壓??讖绞侵腹潭ㄏ囝w粒的孔隙大小,對(duì)于蛋白質(zhì)和大分子分析較為重要。
5、柱尺寸:柱尺寸指的是柱的長(zhǎng)度和內(nèi)徑。選擇適當(dāng)?shù)闹叽缈梢愿鶕?jù)樣品量、分析時(shí)間和分離效果進(jìn)行平衡。